一、如何區(qū)分不同級別的生物安全柜？

生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時，用來保護操作者本人、實驗室環(huán)境以及實驗材料，使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計的。

生物安全柜可分為Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級。

Ⅰ級生物安全柜可保護工作人員和環(huán)境而不保護樣品。氣流原理和實驗室通風櫥一樣，不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器。一級生物安全柜本身無風機。Ⅱ級生物安全柜是目前應用最為廣泛的柜型。 與Ⅰ級生物安全柜一樣，Ⅱ級生物安全柜也有氣流流入前窗開口，被稱作“進氣流”，用來防止在微生物操作時可能生成的氣溶膠從前窗逃逸。與Ⅰ級生物安全柜不同的是，未經(jīng)過濾的進氣流會在到達工作區(qū)域前被進風格柵俘獲，因此試驗品不會受到外界空氣的污染。

Ⅱ級生物安全柜的一個獨te之處在于經(jīng)過HEPA過濾器過濾的垂直層流氣流從安全柜頂部吹下，被稱作“下沉氣流”。下沉氣流不斷吹過安全柜工作區(qū)域，以保護柜中的試驗品不被外界塵?；蚣毦廴尽Ｒ虼?，所有的Ⅱ級生物安全柜都可提供工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護。

Ⅲ級生物安全柜是為4級實驗室生物安全等級而設(shè)計的，是目前世界上zui高安全防護等級的安全柜。柜體完quan氣密，100%全排放式，所有氣體不參與循環(huán)，工作人員通過連接在柜體的手套進行操作，俗稱手套箱(Golve box)，試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全柜以確保不受污染，適用于高風險的生物試驗。

二、Ⅱ級生物安全柜的分類及選型有哪些？

Ⅱ級生物安全柜按排放氣流占系統(tǒng)總流量的比例及內(nèi)部設(shè)計結(jié)構(gòu)，將其劃分為A1、A2、B1、B2四個類型。

A1型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.4m/s。安全柜內(nèi)70%氣體通過高效空氣過濾器過濾后再循環(huán)至工作區(qū)，30%氣體通過排氣口的高效空氣過濾器排出。安全柜內(nèi)的污染氣流經(jīng)過高效空氣過濾器過濾后可以排到實驗室或經(jīng)安全柜的外排接口通過排風管道排到大氣中。

A2型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū)，30%的氣體通過排氣口過濾排除。安全柜內(nèi)的污染氣流經(jīng)過高效空氣過濾器過濾后可以排到實驗室或經(jīng)安全柜的外排接口通過排風管道排到大氣中。安全柜的負壓環(huán)繞污染區(qū)域的設(shè)計，阻止了柜內(nèi)物質(zhì)的泄漏。

B1型生物安全柜前窗操作口流入氣流的zui低流速為0.50m/s，柜內(nèi)氣體中30%氣體通過高效空氣過濾器過濾后再循環(huán)使用，70%氣體通過排氣口HEPA過濾器過濾后通過專用風道排入大氣中。所有被生物污染的部位均應保持負壓，或被負壓的通道和負壓通風系統(tǒng)包圍。

B2型生物安全柜前窗操作口流入氣流的zui低流速為0.5m/s，柜內(nèi)下降氣流全部是由柜外供給，即安全柜排出的氣體不再循環(huán)使用。柜內(nèi)的氣流經(jīng)過濾后排入大氣，不允許再進入安全柜循環(huán)或返流回實驗室，可同時提供生物性和化學性的安全控制。所有污染部位均應處于負壓狀態(tài)或者被負壓區(qū)包圍。

三、生物安全柜檢測依據(jù)什么標準？

生物安全柜檢測現(xiàn)行的主要標準依據(jù)有：

（1）歐盟EN 12469：2000《Biotechnology-Peformance Criteria for Microbiological Safety Cabinets》

（2）美國NSF/ANSI 49—2002《Class II(Laminar Flow) Biosafety Cabinetry》；

（3）JG 170-2005中華人民共和國建筑工業(yè)行業(yè)標準《生物安全柜》；

（4）YY 0569-2011中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標準《Ⅱ級生物安全柜》。

鑒于生物安全柜危險的使用環(huán)境，在安裝時以及以后每隔一定時間，要由具有CMA檢測資質(zhì)與能力的第三方檢驗檢測機構(gòu)按照規(guī)定對每一臺生物安全柜的整體運行性能進行性能檢測，以檢查其是否符合國家及國際的性能標準保證使用者的安全。

四、生物安全柜檢測主要檢測哪些指標？

生物安全柜檢測主要包括物理學檢測和生物學檢測兩個方面，根據(jù)檢測性質(zhì)可分為首ci檢測、后續(xù)檢測。除生物安全柜的一年一度的常規(guī)檢測外，下列情況之一時，如安裝后、移動后、檢修后、更換過濾器后，也必須進行現(xiàn)場生物安全柜檢測。

按照《Ⅱ級生物安全柜》（YY0569-2015）、《生物安全柜》（JG170-2005）和《消毒技術(shù)規(guī)范》（2002年版）要求，Ⅱ級生物安全柜檢測指標包括高效過濾器檢漏、潔凈度、下降氣流流速、工作窗口進口平均風速、溫升、氣體流向、照度、噪聲、振幅、紫外線燈強度。安裝后、移動后、檢修后、更換過濾器后還必須加測柜檢漏和人員安全性、受度樣本安全性和交叉感染。Ⅲ級生物安全柜還須檢測靜壓差。

五、使用生物安全柜有哪些注意事項？

（1）超凈工作臺≠生物安全柜。超凈工作臺看似和生物安全柜非常相似，但超凈工作臺只保護工作區(qū)的樣品免受外部環(huán)境污染，并不能保護操作人員。

（2）請勿使用生物安全柜處理有毒、易燃、易爆等材料。

（3）應避免使用明火。因明火產(chǎn)生的熱效應會干擾生物安全柜操作區(qū)內(nèi)的氣流穩(wěn)定，且火焰熱氣會影響濾器的壽命。如必須使用，可根據(jù)需要選取即用即燃式滅菌器具或微型接觸式燃燒器。

（4）請勿在生物安全柜內(nèi)擺放過多物品，否則會影響安全柜氣流和安全性能。

（5）合理選擇生物安全柜的安裝地點。應當盡量遠離外部氣流干擾因素，例如門窗、空調(diào)通風口、人員過道以及其他實驗室氣流干擾設(shè)備（安全柜、通風櫥等）。

（6）生物安全柜中一般不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話，應該每周進行清潔，以除去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。

（7）在安全柜使用前后，請按照程序為安全柜進行表面除菌。使用適當?shù)南緞?，例?/span>70%的異丙醇溶劑擦拭安全柜的工作區(qū)表面，包括前后的近期格柵。

（8）注意安全柜自凈周期。開啟關(guān)閉安全柜時，讓安全柜自主運行3-5分鐘的自凈周期。這個自凈程序可以清除安全柜的工作區(qū)域內(nèi)可能存在的經(jīng)空氣傳播的污染物。

（9）確保安全柜在工作時前窗處于正確的額定操作高度。

（10）正確著裝為操作中提供必要保護。當進行高危險性操作，例如生物安全水平2+到3級操作時，應選用長袖、背面開口的隔離衣和兩副手套，并確保外層手套套住隔離衣袖口。不能有暴露在外的肌膚。

（11）在安全區(qū)域內(nèi)進行操作。切勿阻塞工作區(qū)前后的通風格柵。盡量在工作區(qū)的中心部位進行操作。

（12）遵循清潔區(qū)到污染區(qū)的操作原則。生物安全柜的工作區(qū)應該被依次劃分為三個區(qū)域：清潔區(qū)、工作區(qū)和污染區(qū)。生物危害性廢棄物袋應放置在污染區(qū)內(nèi)；實驗儀器和樣品應放置在工作區(qū)域；而實驗供給品應放置在潔凈區(qū)內(nèi)。在工作臺面上的實驗操作應該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進行。

六、如何判斷高效過濾器需要更換?

（1）風速變小。當檢測發(fā)現(xiàn)潔凈度指標正常、下降氣流或流入氣流流速變小時；或者設(shè)備在運行過程中，若設(shè)備發(fā)出聲光報警且是因下降氣流或流入氣流流速低造成的(顯示窗口分別所顯示數(shù)值低于設(shè)計要求)說明過濾器堵塞己十分嚴重，風機轉(zhuǎn)速己達到最大值，系統(tǒng)無論如何調(diào)整都無法達到規(guī)定的風速值，此時必須更換過濾器。

（2）壓力傳感器報警。當壓力指示器顯示值大于170Pa時報警系統(tǒng)報警。

（3）檢測高效過濾器完整性發(fā)現(xiàn)有泄漏。

（4）氣流模式改變時。通過檢測發(fā)現(xiàn)，垂直氣流（下降氣流）出現(xiàn)死角和回流，有煙霧從柜內(nèi)泄漏出來，或進入柜內(nèi)的煙霧有外逸時。

（5）控制面板上的風機累計運行時間，如果達到10000小時，通常需要更換過濾器，但不是必須更換，還要考慮使用環(huán)境的潔凈程度，使用習慣等。